CRISPR/Cas9消除经PMA/TSA处理,被感染的人类T细胞中的HIV-表达。
Kaminskietal.
年3月4日发表在《科学报告》上的论文EliminationofHIV-GenomesfromHumanT-lymphoidCellsbyCRISPR/Cas9GeneEditing提出一种新方法,使用RNA介导的CRISPR/Cas9DNA编辑系统精确去除潜伏感染的人类CD4+T细胞中的整个HIV-基因组,该基因组位于整合后的前病毒DNA的5’端和3’端LTR之间。
彻底治愈艾滋病需要对付的难题之一在于潜伏感染的CD4+T细胞。现有的抗逆转录病毒疗法(ART)实际上可以有效控制患者的败血症并恢复T细胞数量,但是无法从潜伏感染的T细胞中去除HIV-。在潜伏感染的CD4+T细胞中,HIV-主要以整合前病毒DNA的形式存在,当T细胞被激活时,会重新产生出具有复制能力的病毒,从而在抗逆转录病毒疗法中断后引起快速反弹。这一病毒储存库的存在导致患者不得不终生维持ART的治疗。
Cas9/gRNAs靶向病毒长末端重复序列,清除宿主T细胞中的HIV-DNA。Kaminskietal.
坦普尔大学的RafalKaminski、WenhuiHu和KamelKhalili及同事利用RNA介导CRISPR/Cas9DNA编辑技术,成功清除了潜伏感染CD4+T细胞中的全部HIV-基因组。通过对已去除HIV-细胞的全基因序列进行综合评估,未发现该CRISPR/Cas9技术产生任何脱靶效应,宿主基因的整体性良好,并进一步显示细胞的活性、周期和凋亡等健康指数也未受到影响。
在已去除HIV-的T细胞中持续共表达Cas9和这种特定靶向介导RNA还能防止它们再次被HIV-感染。慢病毒投递的CRISPR/Cas9使原始感染CD+T细胞中的HIV-复制量明显降低,也大大减少了活体外环境下来自患者的CD4+T细胞中的病毒载量。
这项研究成果意味着,CPRISPR/Cas9基因编辑或许可以为清除CD4+T细胞中HIV-DNA提供一条新的治疗途径,并成为一种潜在的新型艾滋病治疗有效平台。?
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EliminationofHIV-GenomesfromHumanT-lymphoidCellsbyCRISPR/Cas9GeneEditing
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